Observación celular tras 12-18 horas de incubaciónAl día siguiente, después de 12-18 horas en la incubadora, el Dr. González reúne al alumnado alrededor de las placas preparadas el día anterior.
Dr. González: Ahora que las células han estado en la incubadora toda la noche, es el momento de comprobar si se han adherido correctamente antes de proceder con las condiciones de estrés y los tratamientos con Suplemento X. Este es un control importante para asegurarnos de que el experimento comienza sobre una base sólida.
Saca con cuidado una placa de la incubadora y la coloca bajo un microscopio invertido, explicando mientras demuestra: Para confirmar la adhesión, inspeccionaréis visualmente varios pocillos con el microscopio. Buscad una monocapa uniforme de células adheridas al fondo del pocillo. Las células deberían aparecer distribuidas de forma homogénea, sin agrupamientos ni huecos.
Medical Supply Company Ltd: https://www.medical-supply.ie/product/multi-well-culture-plateps-24-wells-85-4x127-6mmtc-treated-sterile-to-sal-10-61-50-case/ Miguel: ¿Y si las células no están distribuidas homogéneamente o parecen inestables? Dr. González: Eso podría indicar un problema durante la siembra, como un pipeteo desigual o una suspensión celular mal mezclada. Si observáis algo así, anotadlo en vuestro cuaderno de laboratorio: es importante documentar cualquier aspecto que pueda afectar a los resultados. Sin embargo, siempre que la mayoría de los pocillos muestren una adhesión adecuada, podemos continuar.
Ajusta el enfoque del microscopio y hace señas para que el alumnado vaya turnándose para observar. Dr. González: Tened cuidado de no inclinar ni sacudir la placa al moverla, porque las células todavía pueden ser sensibles a las perturbaciones. Una vez que hayáis completado las comprobaciones y confirmado la adhesión, prepararemos los pasos siguientes para introducir las condiciones de estrés y los tratamientos con Suplemento X.
El alumnado comienza a inspeccionar sus placas, guiados por el Dr. González, y las células presentan buen aspecto.
Células HeLa: Fraunhofer-Institut für Biomedizinische Technik, St. Ingbert, Paul Anastasiadis, Eike Weiß, CC BY-SA 3.0 <http://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/>, via Wikimedia Commons
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