Aislamiento de ADN: Reactivos experimentales

Eres un estudiante de último año de grado que está completando su Trabajo de Fin de Grado en el laboratorio del Dr. Vázquez. El trabajo del Dr. Vázquez se centra en esclarecer los mecanismos fisiopatológicos que contribuyen al desarrollo de la insuficiencia cardíaca. Este trabajo espera que estos conocimientos puedan proporcionar objetivos terapéuticos novedosos. Tu proyecto se enfoca en estudiar el papel de una proteína recientemente identificada, noveltin, en la función y disfunción cardíaca, utilizando un modelo de ratón transgénico. Tu trabajo incluirá experimentos comparativos con ratones control, que sobreexpresan el gen de noveltin.

Es muy importante identificar correctamente a los ratones que portan el gen (grupo experimental) y compararlos con los ratones con expresión normal de noveltin (grupo control). Tu supervisor te pide que primero aísles el ADN de las colas de los ratones y, posteriormente, realices una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para genotiparlos.

Decides utilizar el kit de purificación de ADN que se usa habitualmente en el laboratorio de tu supervisor (QIAGEN).

Sitio Web: DNA purification kit (QIAGEN)

Revisas las instrucciones del fabricante y ves que se utilizan varios reactivos, incluidos tampones de lisis, proteinasa K, etanol, tampones de lavado y un tampón de elución. Aunque los pasos están claramente definidos, no se proporciona información sobre el papel de cada reactivo en el kit. Por ello, decides hablarlo con tu supervisor, quien te pregunta cuál de estos reactivos es el principal responsable de desnaturalizar proteínas y facilitar la ruptura de tejidos y células.