Electroforesis en gel

Tú: Entonces, la electroforesis en gel es lo que necesitamos para empezar a visualizar los fragmentos de ADN generados por la digestión con enzimas de restricción. ¿Podríamos repasar cómo funciona esta técnica?

Daniel: ¡Claro! La electroforesis en gel separa los fragmentos de ADN según su tamaño. Colocamos las muestras de ADN en un gel de agarosa y aplicamos una corriente eléctrica, lo que hace que los fragmentos de ADN se desplacen.

Dr. Sanjurjo: Exacto. Los fragmentos de ADN que tienen carga negativa migran hacia el electrodo positivo. Los fragmentos más pequeños se mueven más rápido y recorren una mayor distancia a través del gel en comparación con los más grandes, lo que los separa según su tamaño.

Embed video: CS9-08 video (from PCR case)

Tú: Y una vez que hemos corrido el gel, lo teñimos para visualizar las bandas, ¿verdad?

Dr. Sanjurjo: Sí, con un tinte que se une al ADN y fluoresce bajo luz ultravioleta, podemos ver los fragmentos como bandas. Esto nos proporciona un patrón inicial, que ouede ser muy útil para evaluar la digestión.

Daniel: Pero para un análisis forense detallado, como la comparación de patrones PLFR, ¿no se requiere un paso adicional?

Dr. Sanjurjo: En efecto, Daniel. Para una identificación precisa, especialmente con ADN genómico complejo, realizaremos un Southern blot. Esto implica transferir el ADN del gel a una membrana y utilizar sondas marcadas para detectar secuencias específicas de ADN.

Tú: So, Southern blotting enhances our ability to match the DNA fragments to historical profiles, adding a layer of specificity.

Dr. Sanjurjo: Exactly. It allows us to identify particular sequences within the DNA fragments, crucial for making precise forensic connections. It essentially creates a DNA fingerprint. 

[As you finish discussing the plan, Dr. Greene receives a call and listens attentively.]

Dr. Sanjurjo: That was the police. They’ve found a second victim and will be sending more samples for analysis. We'll need to prepare for additional work, but with your understanding of these techniques, we're in good shape to handle it.

Daniel:  I am sorry to hear that Dr. Sanjurjo. Hopefully, we can help solve these cases.

Dr. Sanjurjo: Let's get everything ready for when the new samples arrive. Your work is critical in moving these investigations forward. In the meantime, let’s process the samples we do have.