Izolarea ADN-ului: Reactivi de laborator

Ești un student în ultimul an de licență și îți finalizezi diploma de licență în laboratorul Dr. Dumitrescu. Cercetarea Dr. Dumitrescu se concentrează pe elucidarea mecanismelor fiziopatologice care contribuie la dezvoltarea insuficienței cardiace. Lucrarea speră că aceste perspective vor oferi noi ținte terapeutice. Proiectul tău se concentrează pe studierea rolului noveltinei nou descoperite în funcția și disfuncția cardiacă, folosind ca model un șoarece transgenic. Munca ta va presupune experimente comparative cu șoareci martor, la care are loc supraexprimarea genei noveltin.

Este foarte important ca șoarecii care poartă gena (grupul experimental) să fie identificați în mod corespunzător și comparați cu șoarecii cu expresie normală a noveltinei (grupul de control). Mentorul tău îți cere să izolezi mai întâi ADN-ul din cozile de șoarece și apoi să efectuezi o reacție în lanț a polimerazei (PCR) pentru a genotipa șoarecii.

Decizi să folosești un kit de purificare a ADN-ului (QIAGEN), care este folosit în mod obișnuit în laboratorul mentorului tău. 

Website: DNA purification kit (QIAGEN)

Te uiți la instrucțiunile producătorului și observi că sunt utilizați o serie de reactivi, inclusiv tampoane de liză, proteinază K, etanol, tampoane de spălare și un tampon de eluție. Deși pașii sunt clar conturați, nu există nicio informație care să explice rolul fiecărui reactiv din kit, așa că discuți acest lucru cu mentorul tău, iar el te întreabă care reactiv este responsabil în principal pentru denaturarea proteinelor și ajutarea la descompunerea țesuturilor și a celulelor.