Plasarea celulelor pe lamele de cultură

Dr. Lupu adună grupul în jurul hotei sterile, unde sunt aranjate frumos plăci de testare cu 24 de godeuri, pipete și medii DMEM etichetate.

https://x.com/pprfoundation/status/873113126455066625/photo/1 

Dr. Lupu: „Astăzi, vom plasa 50.000 de celule HeLa per godeu într-o placă de testare cu 24 de godeuri, folosind 500 µL de mediu per godeu. Această densitate menține celulele în creștere în faza logaritmică, asigurând rezultate consistente și reproductibile.”

El ia o lamă și face o demonstrație. „Când se plasează, pipetați ușor de-a lungul peretelui godeului pentru a evita bulele și a asigura o atașare uniformă a celulelor. După însămânțare, lamele vor intra în incubator timp de 12-18 ore pentru a permite celulelor să adere. Mâine, vom adăuga condițiile de stres și tratamentele cu Suplimentul X. ”

Elena: „De ce exact 50.000 de celule per godeu?”

Dr. Lupu: „O întrebare excelentă. Prea puține celule nu ar da rezultate fiabile, iar prea multe ar duce la supraaglomerare, limitând creșterea și introducând variabilitate.”

Mihai: „De ce să nu folosim mai multe medii de cultură?”

Dr. Lupu: „500 µL este o cantitate optimizată pentru aceste godeuri. Prea mult mediu diluează stresul în condițiile de testare, iar prea puțin ar putea epuiza nutrienții înainte de finalizarea experimentului.”

Dr. Lupu așează lama înapoi și arată spre suspensia celulară. „Să resuspendăm celulele uniform înainte de a le plasa pe lame pentru a evita aglomerarea. Nu vă grăbiți, deoarece precizia este esențială aici. Aveți întrebări înainte de a începe?”

Dr. Lupu îi îndrumă pe studenți spre incubatorul care este setat la condițiile corecte (37 ^⁰C, niveluri atmosferice de O₂, niveluri de CO₂ de 5% ) și îi avertizează să fie atenți, deoarece îl folosesc și alți studenți. Studenții își plasează celulele pe plăci și le pun în incubator. 

Sursa: Bioprocess Online https://www.bioprocessonline.com/doc/galaxy-s-co-incubator-0001 

Mergi la