Πείραμα #4: Κλασματοποίηση και διαχωρισμός κυττάρων

Εσείς: «Πιστεύω ότι η φυγόκεντρος θα ήταν χρήσιμη σε ένα πείραμα που περιλαμβάνει κλασματοποίηση και διαχωρισμό κυττάρων.»

Έμμα: «Αυτό μου φάνηκε λίγο γενικό και γι’ αυτό δεν ήταν η πρώτη μου επιλογή. Κυρία Δρ. Σμιθ, θα μπορούσατε να μας δώσετε ένα παράδειγμα;»

Δρ. Σμιθ: «Φανταστείτε ότι έχετε ένα δείγμα ηπατικού ιστού ή μια καλλιέργεια κυττάρων. Ο στόχος εδώ είναι να τα διασπάσετε απαλά — συνήθως με τη βοήθεια ενός ομογενοποιητή — ώστε όλα τα οργανίδια και τα ενδοκυτταρικά συστατικά να απελευθερωθούν και να σχηματίσουν ένα ομογενοποιημένο εκχύλισμα ιστού. Σε αυτό το σημείο, η φυγόκεντρος γίνεται πραγματικά ανεκτίμητη.»

Έμμα: «Όμως, θα ήταν αρκετός ένας μόνο διαχωρισμός; Τα κυτταρικά συστατικά δεν έχουν όλα την ίδια πυκνότητα.»

Δρ. Σμιθ: «Σωστά, Έμμα, και σε ευχαριστώ που το ανέφερες! Αυτό που πρέπει να κάνουμε είναι να περιστρέψουμε το ομογενοποιημένο δείγμα βήμα-βήμα σε όλο και υψηλότερες ταχύτητες. Με αυτόν τον τρόπο μπορούμε να απομονώσουμε προσεκτικά διαφορετικά τμήματα του κυττάρου, ανάλογα με την πυκνότητά τους. Για παράδειγμα, μία αρχική φυγοκέντρηση μπορεί να ιζήσει τους πυρήνες και τα πιο βαριά κυτταρικά υπολείμματα στον πυθμένα του σωλήνα, αφήνοντας τα ελαφρύτερα οργανίδια και τις πρωτεΐνες του κυτταροπλάσματος στο υπερκείμενο υγρό. Μια δεύτερη, ταχύτερη φυγοκέντρηση του υπερκειμένου μπορεί έπειτα να διαχωρίσει τα μιτοχόνδρια ή άλλα οργανίδια. Τελικά, καταλήγουμε με διακριτά στρώματα ή κλάσματα, το καθένα από τα οποία περιέχει διαφορετικές κυτταρικές δομές.»

Διαφορική φυγοκέντρηση καλλιεργημένων κυττάρων (https://biologynotesonline.com/differential-centrifugation/)

Σκεφτήκατε όλες τις επιλογές σας;