Metoda lamei cu striații și culturi pure

Tu: Dr. Stănescu, acum că am cuantificat încărcarea bacteriană, care este următorul nostru pas?

Dr. Stănescu: Trebuie să izolăm culturi pure pentru teste suplimentare. Acest pas este crucial deoarece trebuie să ne asigurăm că bacteriile pe care le studiem nu sunt amestecate cu alte tipuri. Astfel, vom putea identifica cu precizie agentul patogen responsabil pentru contaminare. Când folosiți culturi contaminate, cum ar fi probele noastre inițiale, există riscul interferenței cu alte bacterii, ceea ce poate denatura rezultatele și duce la identificare greșită.

Sorin: Nu ar trebui să folosim metoda lamei cu striații pentru a izola culturi pure?

Tu: Așa este, îmi amintesc că am învățat despre asta la curs. Ar fi bine să exersăm înainte de a folosi probele propriu-zise.

Continui să exersezi folosind instrumentul de simulare online:

https://webcampus.med.drexel.edu/simulation/microbiology/lab1/ și următorul videoclip.

Siguri pe voi, continuați cu tehnicii urmând pașii de mai jos.

Materiale:

• Plăci de agar LB
• Arzătoare Bunsen
• Bucle de inoculare
• Pipetă de 200 mL cu vârf steril
• Markere

Instrucțiuni:

• Etichetați fundul lamei de agar cu informațiile relevante, inclusiv data și identitatea specimenului.
• Sterilizați ansa de inoculare trecând-o prin flacăra becului Bunsen până când devine roșie. Lăsați-o să se răcească.
• Introduceți ansa de inoculare răcită în recipientul care conține cultura mixtă.
• Trasați ușor bucla pe un cadran (aproximativ un sfert) al suprafeței lamei de agar, creând linii paralele sau un model în zig-zag.
• Flambați din nou ansa pentru a o steriliza, apoi lăsați-o să se răcească.
• Pentru a inocula al doilea sector, rotiți placa cu aproximativ 90 de grade. Suprapuneți ușor primul sector striat, apoi, cu ajutorul ansei, faceți striații în a doua zonă sterilă a lamei.
• Creați un alt set de striații în acesată porțiune a lamei.
• Repetați procesul pentru restul zonelor. Sterilizați și răciți ansa încă o dată. Rotiți din nou placa și faceți striații în a treia zonă, suprapunând ușor peste cea anterioară.
• Continuați acest proces pentru a crea un al patrulea set final de striații, asigurându-vă că ansele sunt sterilizate între fiecare set.
• Acoperiți placa de agar, întorceți-o și lăsați-o la incubat peste noapte la 37°C .