EcoRIDaniel: Cuando se trata de cortar el ADN en sitios de reconocimiento específicos, las enzimas de restricción son esenciales. Son muy específicas y producen patrones de fragmentos predecibles, que es lo que necesitamos para la comparación en los análisis forenses. Fuente: Canva Tú: También hay que tener en cuenta el tipo de extremos que produce la enzima. Para el análisis forense, los extremos cohesivos pueden ser ventajosos, ya que pueden facilitar los pasos posteriores si queremos hacer ligación o para la manipulación posterior de los fragmentos de ADN. Dr. Sanjurjo: Ambos estáis destacando adecuadamente las principales consideraciones que hay que tener. La especificidad de la enzima y el tipo de cortes que realiza son esenciales. ¿Cuáles son algunas de las enzimas de restricción más comúnmente utilizadas en nuestro contexto? Tú: Enzimas como EcoRI e HindIII se utilizan con frecuencia debido a su actividad bien caracterizada y a la facilidad con la que producen patrones de fragmentos claros e interpretables. Estas enzimas pueden ayudarnos a establecer perfiles genéticos claros, necesarios para comparar el ADN en las escenas del crimen. Daniel: También producen extremos cohesivos, que son particularmente útiles porque facilitan los pasos de clonación, en caso de que necesitemos amplificar o analizar más a fondo los fragmentos. Dr. Sanjurjo: Ambos habéis identificado aspectos clave en la selección de enzimas para el análisis forense. Elegir la opción correcta nos permitirá generar resultados precisos y fiables. Pongamos en práctica estas ideas en nuestro caso de hoy. [Las enzimas endonucleasas de restricción se denominan siguiendo una convención específica que refleja su origen y descubrimiento. La primera letra del nombre de la enzima procede del género de la bacteria de la que se ha aislado y va en mayúscula, mientras que las dos letras siguientes proceden del nombre de la especie y van en minúscula. Por ejemplo, en "EcoRI," "Eco" procede de Escherichia coli. Si es necesario, una letra o número adicional puede denotar la cepa específica de la bacteria. En el caso de EcoRI, no se incluye la designación de la cepa, pero podría aparecer como "EcoR", donde "R" podría indicar una cepa concreta. Los números romanos se utilizan al final del nombre para mostrar el orden en el que se descubrieron las enzimas dentro de la misma especie o cepa, con "I" indicando la primera enzima de restricción descubierta en esa cepa bacteriana. Así, EcoRI denota la primera enzima de restricción aislada de Escherichia coli. Esta nomenclatura estandarizada ayuda a categorizar las enzimas de restricción en función de su origen biológico y orden de descubrimiento]. [La ADN ligasa une las cadenas de ADN, facilitando la formación de enlaces fosfodiéster en la cadena principal del ADN. Esto es especialmente importante durante la replicación del ADN y en el proceso de clonación molecular, en el que se insertan fragmentos de ADN en vectores La transcriptasa inversa es una enzima que desempeña un papel clave en la conversión del ARN en ADN complementario (ADNc). Se utiliza mucho en biología molecular cuando se trabaja con plantillas de ARN, sobre todo para generar bibliotecas de ADNc o amplificar secuencias de ARN mediante la PCR de transcripción inversa. La Taq polimerasa es una enzima termoestable que se utiliza para sintetizar ADN durante la PCR. Se encarga de amplificar el ADN añadiendo nucleótidos al extremo 3' de una cadena de ADN durante ciclos térmicos repetidos]. |
Map: CS9 - DIGESTIÓN DE ADN CON ENDONUCLEASAS DE RESTRICCIÓN_ES (1027)
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