Ηλεκτροφόρηση πηκτής

Εσείς: Άρα, η ηλεκτροφόρηση τζελ είναι η τεχνική που χρειαζόμαστε για να αρχίσουμε να οπτικοποιούμε τα θραύσματα DNA από την πέψη με ενδονουκλεάση. Μπορούμε να δούμε πώς λειτουργεί αυτή η τεχνική;

Eρίκκος: Φυσικά! Η ηλεκτροφόρηση γέλης διαχωρίζει τα θραύσματα DNA βάσει του μεγέθους τους. Τοποθετούμε τα δείγματα DNA σε γέλη αγαγόζης και εφαρμόζουμε ηλεκτρικό ρεύμα, το οποίο προκαλεί την κίνηση των θραυσμάτων DNA.

Δρ Κρίνη: Ακριβώς. Τα αρνητικά φορτισμένα θραύσματα DNA μετακινούνται προς τον θετικό ηλεκτρόδιο. Τα μικρότερα θραύσματα κινούνται γρηγορότερα και διανύουν μεγαλύτερες αποστάσεις μέσα από τη γέλη σε σχέση με τα μεγαλύτερα, διαχωρίζοντάς τα έτσι κατά μέγεθος.

Εσείς: Και αφού τρέξουμε τη γέλη, τη χρωματίζουμε για να οπτικοποιήσουμε τις ζώνες, σωστά;

Δρ Κρίνη: Ναι, με ένα χρωστικό που δεσμεύει το DNA και φθορίζει υπό υπεριώδης ακτινοβολία, μπορούμε να δούμε τα θραύσματα ως ζώνες. Αυτό μας δίνει ένα αρχικό μοτίβο, το οποίο μπορεί να είναι πολύ χρήσιμο για την εκτίμηση της πέψης.

Eρρίκος: Αλλά για μια πιο λεπτομερή ανάλυση, όπως η αντιστοίχιση των προτύπων RFLP, δεν χρειαζόμαστε και ένα άλλο βήμα;

Δρ Κρίνη: Αυτό είναι σωστό. Για ακριβή ταυτοποίηση, ειδικά με πολύπλοκο γονιδιωματικό DNA, θα πραγματοποιήσουμε την τεχνική του Southern blotting. Αυτό περιλαμβάνει τη μεταφορά του DNA από τη γέλη σε μια μεμβράνη και τη χρήση σηματοδοτημένων προβαμάτων για να ανιχνεύσουμε συγκεκριμένες αλληλουχίες DNA.

Εσείς: Άρα, το Southern blotting ενισχύει την ικανότητά μας να αντιστοιχίσουμε τα θραύσματα DNA σε ιστορικά προφίλ, προσθέτοντας ένα επίπεδο εξειδίκευσης.

Δρ Κρίνη: Ακριβώς. Μας επιτρέπει να αναγνωρίσουμε συγκεκριμένες αλληλουχίες μέσα στα θραύσματα DNA, κάτι που είναι κρίσιμο για να κάνουμε ακριβείς εγκληματολογικές συνδέσεις. Στην ουσία δημιουργεί ένα αποτύπωμα DNA.
[Καθώς τελειώνετε τη συζήτηση για το σχέδιο, η δρ Κρίνη λαμβάνει ένα τηλεφώνημα και ακούει προσεκτικά.]

Δρ Κρίνη: Ήταν η αστυνομία. Βρήκαν ένα δεύτερο θύμα και θα στείλουν περισσότερα δείγματα για ανάλυση. Θα χρειαστεί να προετοιμαστούμε για επιπλέον εργασία, αλλά με την κατανόησή σας για αυτές τις τεχνικές, είμαστε σε καλή κατάσταση για να το χειριστούμε.

Ερίκκος: Λυπάμαι που το ακούω. Ελπίζω να μπορέσουμε να βοηθήσουμε στην επίλυση αυτών των υποθέσεων.

Δρ Κρίνη: Ας ετοιμάσουμε τα πάντα για όταν φτάσουν τα νέα δείγματα. Η δουλειά σας είναι κρίσιμη για την πρόοδο αυτών των ερευνών. Στο μεταξύ, ας επεξεργαστούμε τα δείγματα που έχουμε.