Τεστ Biuret

Εσείς: Θυμάμαι ότι το τεστ Benedict είναι ένα άλλο τεστ για αναγωγικά σάκχαρα, ενώ το τεστ διφαινυλαμίνης υποδεικνύει την παρουσία DNA.

[Τεστ Benedict:Το αντιδραστήριο Benedict έχει έντονο μπλε χρώμα. Αποτελείται από διάλυμα θειικού χαλκού, ανθρακικού νατρίου και κιτρικού νατρίου. Παρουσία ενός αναγωγικού σακχάρου, δέχεται ηλεκτρόνια προκαλώντας την αλλαγή του χρώματος. Το διάλυμα γίνεται επίσης θολό λόγω του σχηματισμού ιζήματος οξειδίου του χαλκού. Οποιαδήποτε χρωματική αλλαγή υποδηλώνει την παρουσία αναγωγικού σακχάρου, ο δε βαθμός της χρωματικής αλλαγής εξαρτάται από τη συγκέντρωση του αναγωγικού σακχάρου. Ένα κίτρινο ή πράσινο χρώμα υποδηλώνει χαμηλή συγκέντρωση αναγωγικού σακχάρου, ενώ ένα κόκκινο ή πορτοκαλί χρώμα είναι ενδεικτικό μεγάλης συγκέντρωσης αναγωγικού σακχάρου. Για περισσότερες πληροφορίες κάντε κλικ στην επιλογή τεστ Benedict.

Πραγματοποιείται παρόμοια με το τεστ Fehling, καθώς 2 ml αντιδραστηρίου Benedict προστίθενται σε 2 ml διαλύματος του δείγματος σε δοκιμαστικό σωλήνα. Στη συνέχεια, το μείγμα θερμαίνεται σε υδατόλουτρο βρασμού για 2 λεπτά και παρατηρούνται χρωματικές αλλαγές.

Τεστ διφαινυλαμίνης: Το DNA μπορεί να ανιχνευθεί ειδικά με τη χρήση του αντιδραστηρίου διφαινυλαμίνης Dische. Το τμήμα δεοξυριβόζης του DNA μετατρέπεται σε μόριο που συνδέεται με τη διφαινυλαμίνη σχηματίζοντας μπλε χρώμα, το οποίο είναι ανάλογο της συγκέντρωσης του DNA.

Πειραματική διαδικασία: Προστίθενται 0,1-2 ml διαλύματος DNA σε 2 ml αντιδραστηρίου διφαινυλαμίνης και τοποθετούνται σε υδατόλουτρο βρασμού για δέκα λεπτά. Παρατηρείται ο σχηματισμός γαλάζιου χρώματος. Για περισσότερες πληροφορίες κάντε κλικ στην επιλογή δοκιμής διφαινυλαμίνης.]

Δρ Μπράουν: Σωστά! Ποιο τεστ θα πρέπει να χρησιμοποιήσετε τότε για την ανίχνευση πρωτεϊνών;

Μόνικα: Λοιπόν, μάθαμε για δύο τεστ αναγνώρισης πρωτεϊνών, το τεστ Biuret και το τεστ Ξανθοπρωτεΐνης.

Εσείς: Το θυμάμαι αυτό- το τεστ Biuret δεν υποδηλώνει την παρουσία πεπτιδικών δεσμών, ενώ το τεστ Ξανθοπρωτεΐνης υποδηλώνει την παρουσία αρωματικών αμινοξέων;

Δρ Μπράουν: Έχετε απόλυτο δίκιο, οπότε ποιο από τα δύο είναι καταλληλότερο για την ιατρική διάγνωση;

Εσείς: Το τεστ Biuret είναι απλούστερο στη διεξαγωγή του και μπορεί να ταυτοποιήσει όλες τις πρωτεΐνες, δεδομένου ότι όλες οι πρωτεΐνες έχουν πεπτιδικούς δεσμούς. Δεδομένου ότι το τεστ Ξανθοπρωτεΐνης ανιχνεύει ειδικά τις πρωτεΐνες που περιέχουν αρωματικά αμινοξέα, είναι χρήσιμο όταν πρέπει να επιβεβαιώσετε την παρουσία αυτών των συγκεκριμένων αμινοξέων σε ένα πρωτεϊνικό δείγμα. Το τεστ Biuret επιτρέπει επιπλέον την ποσοτική ανάλυση των πρωτεϊνών στο δείγμα με τη μέτρηση της έντασης της αλλαγής του χρώματος με τη χρήση φασματοφωτομέτρου.

[Τεστ ξανθοπρωτεΐνης:

Η διαδικασία χρησιμοποιεί αλβουμίνη αυγού ως δείγμα πρωτεΐνης. Σε 3 ml 1% αλβουμίνης αυγού προστίθεται 1 ml πυκνού νιτρικού οξέος. Πρέπει να εμφανιστεί ένα λευκό ίζημα. Το διάλυμα βράζεται μέχρι να γίνει κίτρινο. Το διάλυμα ψύχεται και προστίθενται 2 ml πυκνού 40% NaOH για να δώσει πορτοκαλί χρώμα, που υποδεικνύει την παρουσία πρωτεΐνης. Για περισσότερες πληροφορίες κάντε κλικ στο τεστ Ξανθοπρωτεΐνης.]

Δρ Μπράουν: Ακριβώς. Τι αλλαγή χρώματος περιμένετε να συμβεί;